如何才能做出高品質(zhì)免疫組化圖片
更新時(shí)間:2023-07-07 點(diǎn)擊次數(shù):538次如何才能做出高品質(zhì)免疫組化圖片
免疫組化:根據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色原理,組織切片中的抗原先和一抗結(jié)合,再利用一抗與標(biāo)記、熒光素等的二抗進(jìn)行反應(yīng),前者再用標(biāo)記辣根過(guò)氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AKP)等的抗(如鏈霉親和素等)結(jié)合,后通過(guò)光學(xué)顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見(jiàn)細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物,從而進(jìn)行對(duì)抗原進(jìn)行定位。
免疫組化(IHC)實(shí)驗(yàn)代測(cè)
結(jié)果展示:
1.預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果 確認(rèn)抗體稀釋倍數(shù)和樣本情況
2.正式結(jié)果圖片:提供染好的片子,結(jié)果以?huà)咂问教峁?,老師可查看任意視野,倍?shù)也可任意調(diào)節(jié)。
3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析(片子分析需另外收費(fèi),可選做)
實(shí)驗(yàn)要求:
客戶(hù)需自備一抗,本公司可代為購(gòu)買(mǎi)一抗。
客戶(hù)需提供詳細(xì)的樣品資料(如組織來(lái)源等),以便于實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。
技術(shù)部將在收到標(biāo)本后15-20個(gè)工作日之內(nèi)將作好的片子交于客戶(hù)。
送樣運(yùn)輸要求:
注意事項(xiàng):
1)石蠟切片制片,組織取樣后應(yīng)立即放入固定液中,避免凍存;
2)冰凍切片制片應(yīng)取用新鮮組織,以免抗原丟失;
我們承諾免免疫組化相關(guān)技術(shù)人員操作規(guī)范,并設(shè)立完備的陰性對(duì)照,為您提供高質(zhì)量的免疫組化檢測(cè)結(jié)果。
免疫組化:服務(wù)內(nèi)容和流程:
1.組織標(biāo)本固定好后,我們開(kāi)始組織脫水、石蠟包埋、石蠟切片;
2.常規(guī)染色(HE染色)或特殊病理染色(masson、PAS染色等);
3.免疫組化檢測(cè);
4.圖片拍照、圖片分析、數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。且拍片位置準(zhǔn)確、效果好,免去您自己花大量時(shí)間坐在顯微鏡前拍片的煩惱。
免疫組化實(shí)驗(yàn)服務(wù):
您需提供:固定好的樣本、石蠟塊均可,一抗;
我們提供:免疫組化實(shí)驗(yàn)報(bào)告、免疫組化結(jié)果圖片、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析和統(tǒng)計(jì)(陽(yáng)性率分析);
實(shí)驗(yàn)周期:2周。
一抗的選點(diǎn)和技巧
(1)單克隆和多克隆抗體的選擇。單克隆和多克隆抗體的內(nèi)在特征決定了它們用于IHC/ICC時(shí)的優(yōu)勢(shì)和限制。單克隆抗體由單個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生,代表了同質(zhì)群體,能夠高親和力高特異性地與單個(gè)表位結(jié)合。這在檢測(cè)蛋白家族的某個(gè)成員時(shí)特別有用,因?yàn)榈鞍准易逵兄弑壤陌被嵬葱浴?/span>
抗體結(jié)合往往依賴(lài)于目標(biāo)蛋白維持其天然的構(gòu)想狀態(tài)。與其他蛋白的相互作用、翻譯后修飾、溫度、pH、固定和鹽濃度都會(huì)影響抗體接近目的表位。多克隆抗體是異質(zhì)的,可識(shí)別多個(gè)表位,因此它們較少受到蛋白構(gòu)象變化的影響。
一般而言,多克隆抗體在一定pH和鹽濃度范圍內(nèi)也比單克隆抗體更為穩(wěn)定。基于這些原因,多克隆抗體更常用于IHC/ICC實(shí)驗(yàn)。
(2)應(yīng)用范圍的選擇。有的一抗只能用于Western Blotting,或免疫組化、免疫熒光、免疫沉淀等;甚至表明石蠟切片或冰凍切片。
(3)種屬反應(yīng)性的選擇。這一點(diǎn)很重要,表明這種抗體可能存在種屬差異,且這種抗體適合檢測(cè)哪種種屬動(dòng)物體內(nèi)的抗原。
(4)種屬來(lái)源,一般兔來(lái)源的多是多克隆;而小鼠來(lái)源的多是單克隆,但也有另外。根據(jù)此來(lái)源來(lái)選擇相應(yīng)的二抗。
(5)生產(chǎn)廠(chǎng)家的選擇。
尊敬的客戶(hù):
本公司有放射免疫技術(shù)服務(wù)、蛋白質(zhì)組學(xué)服務(wù)、免疫組化、PCR技術(shù)服務(wù)、生物信息學(xué)數(shù)據(jù)分析等,如果您想了解免疫組化的更多內(nèi)容或者其他服務(wù)信息,您可以本公司的服務(wù)熱線(xiàn)了解更多產(chǎn)品的詳細(xì)信息,至善至美的服務(wù)是我們永無(wú)止境的追求,歡迎新老客戶(hù)放心選購(gòu)自己心儀產(chǎn)品,我們將竭誠(chéng)為您服務(wù)!