綿羊抗人B因子血清使用說明

產(chǎn)品名稱：綿羊抗人B因子血清

產(chǎn)品規(guī)格：1ml

儲(chǔ)存條件：具體以瓶身標(biāo)簽為準(zhǔn)

有效期：一年

宿主：綿羊

成分：抗血清、防腐劑

純度：免疫電泳法檢測，呈單一沉淀線

應(yīng)用范圍：酶標(biāo)試劑、免疫比濁試劑、免疫膠乳試劑生產(chǎn)、提取純化抗體、組化實(shí)驗(yàn)中對應(yīng)抗原，或封閉對應(yīng)雜抗體，測定對應(yīng)抗原濃度，或抗原夾芯法測定對應(yīng)抗體，吸收雜抗原成分，層析純化抗原，分析與鑒定對應(yīng)抗原成分，封閉交叉抗原，測定對應(yīng)抗原成分，測定抗原純度等。

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本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用，不做其它用途！

注意事項(xiàng)：

1.液體抗血清保存原則：避免反復(fù)凍融

2.短期保存的抗血清：2-8℃短暫保存數(shù)周對活性沒有影響。

3.長期保存的抗體：建議收到后分裝于-20℃保存。

 特異性IgG抗體的制備

 在標(biāo)記的免疫測定或其他技術(shù)中將特異性抗體純化出來，是極為重要的。例如在ELISA，用于包被的抗體一定要用特異性IgG，才能得到良好的效果。這是因?yàn)槿逯杏写罅糠强贵w蛋白，如白蛋白、α1和α2球蛋白等，如不除去，會(huì)干擾包被。再如反相間接血凝，致敏紅細(xì)胞的抗體也需用特異性IgG的I（ab'）2才能使實(shí)驗(yàn)滿意。特異性IgG和F（ab'）2的制備方法有如下幾種。

 （一）粗提法提取球蛋白

 大多用硫酸銨鹽析法或硫酸鈉鹽析法。硫酸銨鹽析須經(jīng)過多次沉淀，第一次用40％飽和度，第二次用35％飽和度，第三次用33％飽和度，經(jīng)三次提取后的γ球蛋白基本是IgG成分。硫酸鈉法更簡便，用20％即可將γ球蛋白沉淀出來。經(jīng)鹽析后的γ球蛋白雖大多屬于IgG，但還有5％其他區(qū)帶蛋白，如γ區(qū)的雜蛋白。又因IgG組分中還含其他所謂正常的IgG，產(chǎn)生干擾。因此鹽析法粗提的γ球蛋白只能用于一般的實(shí)驗(yàn)，或者是抗體效價(jià)較高的抗血清。

 （二）離子交換層析法提取IgG

常用的離子交換劑有DEAE纖維素或QAE纖維素，以QAE-Sephadex最為理想，DE22、32、52也可應(yīng)用。取QAE-SephadexA25或A50經(jīng)酸處理并在0.05mol/LpH7.5～8.6的磷酸鹽緩沖液中平衡，將水分抽干，稱濕重Ig加于10ml血清中，在室溫30min后，離心或過濾除去離子交換劑。上清液再如此處理一次，即獲得較純的IgG，甚至不含其他雜蛋白。用該技術(shù)純化IgG簡便，不損壞抗體，既可小量提取，也可大量制備。